Gemini アプリケーションノート・日本ハム FASTKITエライザVer.III 卵 (Stratec)

日本ハム中央研究所製食物アレルゲン検査キット FASTKITエライザVer.III 卵の自動化

図1　食物アレルゲン検査キット FASTKITエライザ Ver.IIIシリーズ

FASTKITエライザVer.IIIシリーズは食品中の食物アレルゲンを検出するキットです。食品衛生法により表示が義務付けられている「卵」、「乳」、「小麦」、「そば」、「落花生」、「大豆」と「ごま」が測定できるキットです。

食物アレルゲン検査の効率化のため、 Gemini(全自動ELISAシステム)を用いて、FASTKITエライザVer.III 卵キットの自動化を試みました。その結果、希釈標準品およびサンプルの測定数値はバラツキも少なく、良好な結果が得られました。

希釈標準品の測定結果

Geminiで標準品の希釈から測定までを全自動で行ったところ、直線性のあるバラツキの少ない結果が得られました（図2、表1）。

図2 FASTKITエライザVer.III 卵希釈標準品の検量線

Geminiで標準品の希釈から測定までを全自動で行い、4パラメータで検量線を作成しました（7段階希釈、n=3)。希釈系列：0 、0.78、 1.56、 3.13、 6.25、 12.5、 25、50 ng/ml

表1 FASTKITエライザVer.III 卵検量線データ

サンプル名	測定値（OD値）	平均値（OD値）	%CV
50 ng/ml	1.46	1.46	0.41
	1.46
	1.45
25 ng/ml	0.79	0.76	2.98
	0.75
	0.75
12.5 ng/ml	0.41	0.38	5.97
	0.38
	0.36
6.25 ng/ml	0.19	0.19	2.30
	0.19
	0.19
3.13 ng/ml	0.10	0.09	1.24
	0.09
	0.09
1.56 ng/ml	0.05	0.04	9.46
	0.04
	0.04
0.78 ng/ml	0.02	0.02	6.94
	0.02
	0.02

サンプル測定結果

市販のクッキー1 g（卵含有）をプロトコールに準じて抽出後、5,000倍希釈し、さらに2倍の６段階希釈したものをサンプルとしました。また、それらを、FASTKITエライザ Ver.III 卵とGeminiを用いて測定・解析したところ、バラツキの少ない結果が得られました。

表2 FASTKITエライザVer.III 卵サンプル定量データ

サンプル名	定量値（ng/ml)	平均値（ng/ml)	%CV
原液 (5,000倍希釈)	64.66	62.12	3.98
	62.01
	59.73
2倍希釈	31.80	31.92	0.34
	32.01
	31.94
4倍希釈	16.99	17.76	4.98
	18.73
	17.58
8倍希釈	8.71	8.36	3.57
	8.22
	8.16
16倍希釈	3.90	3.94	4.24
	3.80
	4.13
32倍希釈	2.09	2.04	1.89
	2.02
	2.02
64倍希釈	0.83	0.81	9.05
	0.87
	0.73
128倍希釈	0.14	0.27	42.79
	0.29
	0.37

まとめ

希釈標準品とサンプル測定・解析結果から、検量線調製からサンプル測定まで、ELISAの全工程をGeminiで精度良く自動化できることが分かりました。

日本ハム株式会社中央研究所について

日本ハム中央研究所は、「食の安全・安心」への取り組みの中で開発された特定原材料（食物アレルゲン）検査と
食中毒菌検査、カビ毒検査用キットを販売しています。

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