Stratec (ストラテック) の製品
Gemini アプリケーションノート・日本ハム FASTKITエライザVer.III 卵 (Stratec)
日本ハム 中央研究所製 食物アレルゲン検査キット FASTKITエライザVer.III 卵 の自動化
FASTKITエライザVer.IIIシリーズは食品中の食物アレルゲンを検出するキットです。 食品衛生法により表示が義務付けられている「卵」、「乳」、「小麦」、「そば」、「落花生」、「大豆」と「ごま」が測定できるキットです。
食物アレルゲン検査の効率化のため、 Gemini(全自動ELISAシステム)を用いて、FASTKITエライザVer.III 卵キットの自動化を試みました。 その結果、希釈標準品およびサンプルの測定数値はバラツキも少なく、良好な結果が得られました。
希釈標準品の測定結果
Geminiで標準品の希釈から測定までを全自動で行ったところ、直線性のあるバラツキの少ない結果が得られました(図2、表1)。
Geminiで標準品の希釈から測定までを全自動で行い、4パラメータで検量線を作成しました(7段階希釈、n=3)。 希釈系列:0 、0.78、 1.56、 3.13、 6.25、 12.5、 25、50 ng/ml
表1 FASTKITエライザVer.III 卵 検量線データ
サンプル名 | 測定値(OD値) | 平均値 (OD値) | %CV |
50 ng/ml | 1.46 | 1.46 | 0.41 |
1.46 | |||
1.45 | |||
25 ng/ml | 0.79 | 0.76 | 2.98 |
0.75 | |||
0.75 | |||
12.5 ng/ml | 0.41 | 0.38 | 5.97 |
0.38 | |||
0.36 | |||
6.25 ng/ml | 0.19 | 0.19 | 2.30 |
0.19 | |||
0.19 | |||
3.13 ng/ml | 0.10 | 0.09 | 1.24 |
0.09 | |||
0.09 | |||
1.56 ng/ml | 0.05 | 0.04 | 9.46 |
0.04 | |||
0.04 | |||
0.78 ng/ml | 0.02 | 0.02 | 6.94 |
0.02 | |||
0.02 |
サンプル測定結果
市販のクッキー1 g(卵含有)をプロトコールに準じて抽出後、5,000倍希釈し、さらに2倍の6段階希釈したものをサンプルとしました。 また、それらを、FASTKITエライザ Ver.III 卵とGeminiを用いて測定・解析したところ、バラツキの少ない結果が得られました。
表2 FASTKITエライザVer.III 卵 サンプル定量データ
サンプル名 | 定量値(ng/ml) | 平均値(ng/ml) | %CV |
原液 (5,000倍希釈) |
64.66 | 62.12 | 3.98 |
62.01 | |||
59.73 | |||
2倍希釈 | 31.80 | 31.92 | 0.34 |
32.01 | |||
31.94 | |||
4倍希釈 | 16.99 | 17.76 | 4.98 |
18.73 | |||
17.58 | |||
8倍希釈 | 8.71 | 8.36 | 3.57 |
8.22 | |||
8.16 | |||
16倍希釈 | 3.90 | 3.94 | 4.24 |
3.80 | |||
4.13 | |||
32倍希釈 | 2.09 | 2.04 | 1.89 |
2.02 | |||
2.02 | |||
64倍希釈 | 0.83 | 0.81 | 9.05 |
0.87 | |||
0.73 | |||
128倍希釈 | 0.14 | 0.27 | 42.79 |
0.29 | |||
0.37 |
まとめ
希釈標準品とサンプル測定・解析結果から、検量線調製からサンプル測定まで、ELISAの全工程をGeminiで精度良く自動化できることが分かりました。
日本ハム株式会社 中央研究所について
日本ハム中央研究所は、「食の安全・安心」への取り組みの中で開発された特定原材料(食物アレルゲン)検査と
食中毒菌検査、カビ毒検査用キットを販売しています。
食中毒菌検査、カビ毒検査用キットを販売しています。