ヒドロキシラジカルプロテインフットプリンティングによるMSベースでのタンパク質の高次構造解析。エピトープ部位や凝集・会合面などをペプチド・残基レベルで解析可能

米国GenNext Technologies (GenNext)社が開発した、Fox®プロテインフットプリンティングシステムはタンパク質の高速光化学的酸化(FPOP)を実現したヒドロキシラジカルプロテインフットプリンティング(HRPF)システムです。
HRPFで処理したサンプルをLC-MS/MSにより分析することで、ラジカル修飾されたペプチドやアミノ酸残基を同定することができます。条件の異なるタンパク質でHRPFを行い、酸化の割合を示差的に解析することで、タンパク質の相互作用部位や薬物結合部位、凝集形成面などがペプチド、アミノ酸残基レベルで明らかになります。
高性能なレーザーフリーの過酸化水素光分解システム

GenNextは、高価で複雑かつ危険なレーザーに代わり、独自開発したレーザーフリーのベンチトップ型Fox(Flash Oxidation)システムにより、コンパクトで費用対効果が高く、安全性の高い優れたFPOP/HRPF解析を実現しました。
GenNext社独自の高エネルギープラズマ光分解源は、わずかなコストで最適なヒドロキシラジカル修飾を可能にします。Fox® Photolysis Systemは、高度に制御されたコスト効率の良い方法で、過酸化水素からヒドロキシラジカルを生成する光分解を行います。
世界初の吸光度によるラジカル濃度測定システム

Fox® Radical Dosimeterは、優れた再現性を実現した世界初のOHラジカル濃度測定システムとして、予期せず変化するバックグラウンドでのラジカル消失に直面しても有効なヒドロキシラジカル濃度の生成を自動で制御します。
このDosimeterは、ほぼリアルタイムでヒドロキシラジカル濃度を測定できるため、質量分析を行う前にバイオ医薬品の溶液やアッセイ条件の問題を簡単に検出することができ、HRPFの使いやすさを大幅に向上させると同時に、ラベリングの信頼性と忠実性を確保することができます。
Fox® Radical Dosimeterは、Fox® Photolysis Systemのすぐ下流に設置されたインラインのキャピラリーUVフォトメーターです。ラジカル生成時の吸光度をリアルタイムで測定し、有効なヒドロキシルラジカル濃度を評価することができます。
カルーセル型自動サンプルコレクター

Fox® Automated Product Collectorは、ラベルしたサンプルを自動的に回収し、指定されたマイクロチューブに分配する、使いやすいコンパクトな装置です。サンプル収集の作業負担をなくし、製品の純度を最大限に高めます。
効率的なボーラス注入を可能にするシリンジポンプ

Fox® Fluidics Moduleはシリンジポンプバルブとインジェクションバルブの二つのバルブで構成されています。バルブの切り替えにより、サンプルをボーラス注入することが出来ます。
大幅な解析時間の短縮を可能としたソフトウェア

GenNextは高速で客観的なデータ分析を行うためのFoxWare®プロテインフットプリンティングソフトウェアを開発しました。FoxWare®ソフトウェアは従来15時間以上費やしていたデータ解析を10分程度で行うことができ、迅速なヒストグラム解析などを行うことが出来ます。
AutoFoxシステム

ハイスループットアプリケーション向けに設計された AutoFox システムは、抗体抗原エピトープおよびパラトープマッピング、薬物標的関与およびアロステリー研究、タンパク質相互作用解析、タンパク質凝集研究、 PROTAC および分子接着剤研究などのための強力なツールです。
AutoFoxシステムの特長
- 最大48個の異なるサンプルを全自動処理
- 面倒な流体接続や光学接続が不要
- サンプルとH2O2のプレミキシングが不要
- サンプルを数秒でラベル可能
- フラッシュランプの強度を自動調整
アプリケーション例
Fox®システムはモノクローナル抗体のエピトープマッピングや創薬ターゲットの薬物結合部位の同定など様々なバイオ医薬品開発のアプリケーションに用いられます。
モノクローナル抗体
・エピトープマッピング
・パラトープマッピング
・凝集研究
・製剤研究
バイオシミラー開発
・対照薬(オリジネーター)の比較
創薬可能なターゲット
・薬物結合部位
・アロステリック
・Kd(解離定数)の決定
生体分子相互作用
・タンパク質ーリガンド
・タンパク質ータンパク質
発現系プラットフォーム研究
賦形剤効果

1.タンパク質の親水表面のアミノ酸側鎖をヒドロキシラジカルで不可逆的に修飾(Fox®システム)
2.修飾したタンパク質を変性させプロテアーゼによる分解消化
3.LC-MS/MSのペプチド定量・定性解析
4.修飾したペプチド(アミノ酸残基)の同定(FoxWare®ソフトウェア)
5.既存の3D構造へのモデリング(FoxWare®ソフトウェア)
ステップ1,4,5はGenNextのシステム・ソフトウェアで実施されるパート



